相差顯微鏡較普通顯微鏡增加的結(jié)構(gòu)
相位差顯微鏡 (Phase Contrast Microscope):
1.相位差顯微鏡的結(jié)構(gòu):
相位差顯微鏡,是應(yīng)用相位差法的顯微鏡。因此,比通常的顯微鏡要增加下列附件:
(a).裝有相位板(相位環(huán)形板)的物鏡,相位差物鏡。
(b).附有相位環(huán)(環(huán)形縫板)的聚光鏡,相位差聚光鏡。
(c).單色濾光鏡-(綠)。
2.功能說明如下:
(a).相位板使直接光的相位移動(dòng)90°,并且吸收減弱光的強(qiáng)度,工具顯微鏡,在物鏡后焦平面的適當(dāng)位置裝置相位板,相位板必須確保亮度,為使衍射光的影響少一些,相位板做成環(huán)形狀。
(b).相位環(huán)(環(huán)狀光圈)是根據(jù)每種物鏡的倍率,而有大小不同,可用轉(zhuǎn)盤器更換。
(c).單色濾光鏡係用中心波長(zhǎng)546nm(毫微米)的綠色濾光鏡。通常是用單色濾光鏡入觀察。相位板用特定的波長(zhǎng),移動(dòng)90°看直接光的相位。當(dāng)需要特定波長(zhǎng)時(shí),必須選擇適當(dāng)?shù)臑V光鏡,濾光鏡插入后對(duì)比度就提高。此外,相位環(huán)形縫的中心,必須調(diào)整到正確方位后方能操作,對(duì)中望遠(yuǎn)鏡就是起這個(gè)作用部件。
大部分的細(xì)胞在顯微鏡下呈透明的,故需染色
使用時(shí)注意事項(xiàng):
使用時(shí),較重要的注意事項(xiàng)為下列三點(diǎn):
(a).執(zhí)行正確的操作方法。
正確操作的較重要事項(xiàng)必須正確地調(diào)整好相位環(huán)的中心。
(b).根據(jù)標(biāo)本的要求,選擇合適的相位差物鏡。
(c).用其他觀察方法作比較,對(duì)標(biāo)本作出正確的判斷。
解像力 原理
裸眼 100μm 人類的眼睛可以看清物體的范圍,有一定的距離,其范圍兩端分別稱為眼的遠(yuǎn)點(diǎn)和近點(diǎn)。 眼睛的近點(diǎn)隨著年齡而異,通常正常人的明視距離約為25公分,如物體移到近點(diǎn)內(nèi),則顯得模煳不清楚。
光學(xué)顯微鏡Optical Microscope 0.2μm
(1).解像力有先天的限制,因此無(wú)法看到小于小細(xì)菌細(xì)胞之直徑以下的細(xì)部構(gòu)造。
(2).由于大部分的細(xì)胞在顯微鏡下呈透明的,故需染色。
(3).增加光學(xué)顯微鏡影像的明暗對(duì)比的方法很多,例如利用染色法處理樣本,或在顯微鏡上附加特殊裝置例如位相差顯微鏡、暗視野顯微鏡、干涉顯微鏡、偏光顯微鏡、X光顯微鏡、螢光顯微鏡、紫外光顯微鏡 等。
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