選購熒光顯微鏡選購濾光片指導(dǎo)說明

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首先在做實(shí)驗(yàn)事前研究人員會先確定所用染料然后選擇熒光激發(fā)塊。
緣由：
1、做實(shí)驗(yàn)之前通常都已經(jīng)查閱了大量的文獻(xiàn)資料，然后根據(jù)參考文獻(xiàn)你知道哪幾種染料可以用在你將要實(shí)驗(yàn)的標(biāo)本上，再從中挑選較適合你的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的染料，選定了染料之后再確定你要使用的熒光激發(fā)塊；
2、另外，你所說的紅光或綠光其實(shí)是指熒光的發(fā)射光的顏色，根據(jù)熒光的原理：熒光的產(chǎn)生是由于某些物質(zhì)的分子受到光刺激之后發(fā)生了能級變化，即分子中的原子受到光刺激后（吸收了能量）從低能級狀態(tài)躍遷到高能級狀態(tài)，由于高能級狀態(tài)很不穩(wěn)定，很容易回到低能級狀態(tài)，根據(jù)能量守恒定律，從高能級狀態(tài)回復(fù)到低能級狀態(tài)的時候必然有能量的釋放（以輻射的形式），因此就有光的產(chǎn)生，這種光就是我們通常說的熒光。所以熒光的產(chǎn)生簡單地說就是stroke法則：短波長的光激發(fā)產(chǎn)生長波長的光。這就是通常我們說的紫外激發(fā)產(chǎn)生藍(lán)光，藍(lán)光激發(fā)產(chǎn)生綠光，綠光激發(fā)產(chǎn)生紅光。所以如果你用的染料是DAPI（發(fā)藍(lán)光），你就要選用紫外激發(fā)塊，如果你選擇GFP（綠光），你就要選用藍(lán)色激發(fā)塊以此類推。

熒光顯微鏡與普通顯微鏡的區(qū)分有三個不同點(diǎn)：

1.照明方式是為落射式，即光源通過物鏡投射于樣品上； 　　

2.光源為紫外光，波長較短，分辨力是高出普通顯微鏡； 　　

3.有兩個濾光片，一個濾光片用于濾除可見光，目鏡和物鏡之間的濾光片用于濾除紫外線，保護(hù)眼睛。 　　

熒光顯微鏡其實(shí)同是屬于光學(xué)顯微鏡這個類別的，主要的不同在于是二者的激發(fā)波長區(qū)別。造成熒光顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡組成結(jié)構(gòu)和操作方式的不同。

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